Diabetologia：激活但功能受到影响的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现出新来肾脏自身血清到显现出新来1改进型癌症流行病学病因的重大突破率在学童时期就有良好的描绘，多个肾脏自身血清特征性的学童中所有70%在血清转换后10年内患上癌症，而随访15年的学童这一比重上升到84%。相较来说之下，占流行病学1改进型癌症一半以上的改进型1改进型癌症的发作机制还无法想得到更进一步的学术研究。

愈加多的人开始可用分先决条件系统会来假设1改进型癌症的重大突破：个棒状在显现出新来多种肾脏自身血清时踏入第1先决条件，显现出新来皮质醇出现异常时踏入第2先决条件，显现出新来病因时踏入第3先决条件。一些多发肾脏自身血清特征性的个棒状，在1期和2期，重大突破较比更快，并持续发展为发作的1改进型癌症。我们以前描绘了一四组在首次扫描到多种肾脏自身血清抽取后至再加10年无癌症的以致于比更快重大突破者，这四组病变数目再加，但完全相同之处非常明确。随后，我们发现肾脏自身蛋白特异性CD8+T巨噬细胞化学反应在重大突破缓比更快的病变中所基本不存在，但在现阶段发作和长期存在的癌症病变中所很容易扫描到。这或许表明，与重大突破病变相较来说，这些病变诱发化学反应的调控大幅提高。

晚期学术研究表明，尽管调控性T巨噬细胞(Treg)数量正常，但癌症病变存在一些特性缺陷，其中所除此以外对IL-2的化学反应能力降低。此外，癌症病变中所的不稳定性CD4+T巨噬细胞或许对调控极具抵抗性，展现为不稳定性T巨噬细胞的选择性减弱，自然导致的Treg和棒状外导致的选择性Treg，以及蛋白亲身经历的CD4+T巨噬细胞中所IL-2化学反应减弱。本学术研究的借此是描绘了CD4+调控性T巨噬细胞(Treg)在一小群以致于缓比更快重大突破者中所的完全相同之处，他们的同期为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法有：BOX学术研究是一项以老年人为基础的纵向学术研究，在21岁以下确诊的病变亲族中所检查1改进型癌症的可怕因素。我们以前描绘了长期缓比更快重大突破者的完全相同之处，他们保持稳定多重肾脏自身血清特征性超过10年，但无法显现出新来癌症的流行病学病因，比更快性或非癫痫诱发。随后，10名此后保持稳定无癌症并希望提供大量血液抽取的缓比更快重大突破者纳入T和B巨噬细胞特性的测试。在目前的学术研究中所，8名比更快重大突破者(SP四组)，中所位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的肾脏自身血清特征性。所有的发起者都始终保持1改进型癌症重大突破的1期，尽管一些人随后失去了肾脏自身血清对某些蛋白的水痘，然而，一名病变仍未始终保持2期至再加6年，但无法显现出新来流行病学病因，一名病变被诊断为癌症，该人脑72岁，在采集实验抽取时，其HbA1c上升到53 mmol/mol(7%)，在数据的测试中所对该供棒状同步进行了单独评估。除去外周血单个核巨噬细胞(PBMCs)，选用多参数流式巨噬细胞心法和T巨噬细胞选择性测试评估供棒状中所Treg的基频、环境因素和特性。可用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和回归)同步进行无监督聚类的测试，评估Treg环境因素。

结果：与身心健康供棒状相较来说，来自比更快重大突破棒状的梦境CD4+T巨噬细胞的监督聚类看出新，作用于的梦境CD4+ Treg基频上升，与糖皮质激素选择性的TNFR方面蛋白(GITR)理解上升有关。一名HbA1c上升的病变与重大突破缓比更快者和匹配的相比较四组相较来说，Treg谱各有完全相同。特性数据已经有，与身心健康供棒状相较来说，来自缓比更快重大突破棒状的Treg介导的CD4+不稳定性T巨噬细胞选择性明显受损。展现为对不稳定性CD4+T巨噬细胞CD25和CD134理解的选择性上升。

平面图1 系统会地的环境因素的测试看出新，CD4+Treg亚改进型在比更快重大突破字段中所上升。由FlowSOM填充的Treg二楼，围住在来自所有供棒状的活CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标示出物理解鉴定出新10个元簇:梦境T巨噬细胞_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +梦境T巨噬细胞;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)可用9个完全相同Treg标示出填充的10个元簇的MST。每个终端代表者一个坦克部队(100个坦克部队)，极大的元坦克部队(10个元坦克部队)在终端四组外面上色。每个终端中所的饼平面图声称单个标示出的理解档次。(b)每个元聚类的热平面图，以看出新整棒状标示出理解。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)填充平面图，以及FlowSOM识别的每个元簇的较厚。(e-l)相较丰度为每个metacluster箱内支线平面图(丰度> 0.05%)确定为HD和SP四组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T巨噬细胞(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T巨噬细胞(l)。浅红色边框代表者捐**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 可用CITRUS的分析表明证实，Treg基频的上升是重大突破缓比更快的标志。分级门控(a - f)和玉米的测试(g-k)比较SP发起者和匹配的HD发起者在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的区别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群棒状的代表者性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解同步进行除去，模拟FlowSOM社会群棒状。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)四组以及供棒状SP 606(浅红色)中所CD25+ cd127的基频汇总平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的箱内支线平面图;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)棉花簇棒状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解强度着色，箭头突出新的簇被识别为SP和HD字段之间的完全相同。(j)箱内支线平面图看出新了在SP(蓝点)和HD(灰点)四组中所，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相较丰度(比重)。(k)数据集看出新每个簇的环境因素(粉色)和Treg标示出相较理解与背景理解(红色);上列，寄存器Treg_3;前面一行，寄存器Treg_4。背景与所有其他簇中所标示出的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

平面图3 与身心健康献血者相较来说，重大突破缓比更快者梦境treg的GITR上升。每个梦境CD4+T巨噬细胞元簇(梦境T巨噬细胞_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +梦境T巨噬细胞;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)扫描每个理解标示出的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)字段的理解热平面图(sp606不除此以外在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇中所所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(浅红色)的FlowSOM GITR理解接在，看出新数据集(c)和汇总平面图(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(浅红色)所有供棒状除此以外，p< 0.05(红色)供棒状SP 606和匹配的HD不除此以外在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR理解，从分级门控，从所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(浅红色)接在，看出新数据集(e)和汇总平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

平面图4 来自缓比更快重大突破的CD4+ treg巨噬细胞支配不稳定性CD4+T巨噬细胞的能力降低。SP四组用红色的支线和边框声称，HD四组用黑色的支线和边框声称，浅红色的支线/边框声称供棒状sp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞同步进行分选。CD4+CD25−(此番者)被标示出为CFSE, Treg按判读的比重氢氧化钠。用抗CD3 /28微珠转化巨噬细胞，培植3当晚同步进行流式巨噬细胞心法扫描。(a-d)与CD4+此番者相较应的treg培植(自棒状)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培植。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE选择性比率(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的选择性比率。可用特征性相比较(作用于的响应巨噬细胞分别为treg)计算选择性比率。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差的测试。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 不稳定性CD4+T巨噬细胞对缓比更快重大突破的T巨噬细胞转化的选择性更敏感。SP四组用红色的支线和边框声称，HD四组用黑色的支线和边框声称，浅红色的支线/边框声称供棒状sp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞同步进行分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标示出，treg按判读的比重氢氧化钠。用抗CD3 /28微珠转化巨噬细胞，培植3当晚同步进行流式巨噬细胞心法(CD25反染)和巨噬细胞因子的测试。HD Treg与HD、SP或sp606此番者协力培植。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE选择性三份(b)。(c,d) CD25选择性三份(c)和CD134选择性三份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在浙大中所的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差的测试。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

正确性：我们得出新的正确性是，来自缓比更快重大突破子的转化梦境CD4+Treg在GITR理解中所想得到了扩展和比较丰富，务实了进一步学术研究Treg在1改进型癌症安全性个棒状中所的举例来说的重要性。

原文出新处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28